Негативна основа за бојење, техника, предности и недостаци



Тхе негативно бојење То је посебна метода бојења којом се наглашава присуство капсуле код неких микроорганизама - углавном Стрептоцоццус пнеумониае, Клебсиелла пнеумониае и Цриптоцоццус неоформанс-, из клиничких узорака или чистих култура.

Директни узорак који се обично користи за наношење негативног бојења је цереброспинална течност. Ова техника представља брзу алтернативу за претпостављену дијагнозу менингитиса, посебно Цриптоцоццус неоформанс.

Исто тако, ова мрља се може нанети на спутум и стерилне течности уопште, као и на сојеве добијене из младих чистих култура. Ова техника користи нигрозин или кинеско мастило за његово извођење; према томе, то је врло једноставна и економска методологија за примјену која пружа информације од велике дијагностичке вриједности у кратком времену.

У том смислу, свака лабораторија је у стању да изведе ову боју. Наравно, лабораторија мора имати компетентно особље, способно да препозна квасце Цриптоцоццус неоформанс изолују или пупају и разликују их од леукоцита и артефаката које узорак може представити.

Индек

  • 1 Фоундатион
  • 2 Техника
    • 2.1 Материјали
    • 2.2 Спецификације за узорковање
    • 2.3 Извођење технике са директним узорцима
    • 2.4 Извођење технике са сојевима из културе
    • 2.5 Посматрање у микроскопу
  • 3 Предности
  • 4 Недостатак
  • 5 Мрље ткива индијским мастилом
  • 6 Референце

Фоундатион

Нигросине и индијска мастила дјелују на сличан начин; према томе, било која од ове две супстанце може се користити наизменично.

Ова техника се назива негативно бојење јер дјелује супротно од осталих техника бојања. У овоме остаје необојена структура која се тражи или коју желите да видите; то јест, микроорганизми.

Према томе, бојење се заснива на бојању дна размаза у тамној боји. У овом сценарију затворене структуре ће бити означене светлом или безбојном бојом.

Генерално, квасци се посматрају рефрингентно, окружени јасним халоом који одговара капсули. Ово се дешава зато што су кинеско мастило и нигрозин супстанце које нису у стању да продру у полисахарид који формира капсулу живих микроорганизама.

Треба напоменути да друге структуре које могу бити присутне у директном узорку, као што су леукоцити или црвене крвне ћелије, не продиру.

Сада, ако су микроорганизми мртви, тинктура може да продре у њих, на такав начин да је ово бојење корисно и за процену виталности микроорганизама..

Техника

Материјали

Нигросине

Нигрозин дугује своје име црној боји коју има. То је синтетичка супстанца која се добија загревањем мешавине органских једињења - као што су нитробензин, анилин и анилин хидрохлорид - користећи катализатор (гвожђе или бакар) у наведеној реакцији..

Кинеско мастило

Кинеско мастило је супстанца коју углавном користе Азијци за писање, израду уметничких дела и монохроматско сликање. Врло је популаран у кинеској култури.

Добија се од мастила за лигње помешаног са угљеним прахом, продукт сагоревања малих смоластих стабала.

Могуће га је припремити и из чађе у спаљивању угљоводоника (биљних уља), заједно са протеинском желатином која му даје праву конзистенцију да би се спречило таложење честица угљеника..

Спецификације за узорковање

- Не захтева пост.

- Узорак ЦСФ, спутума или стерилне течности мора да садржи најмање 1 мл запремине и мора се одмах пренети на собну температуру у лабораторију..

- ЦСФ и стерилне течне узорке треба узети од стране специјализованог лекара.

- Такође може бити чиста култура сумњивог соја везаног за горе поменуте патогене.

Извођење технике са директним узорцима

- Узорци се морају центрифугирати, затим се супернатант одбацује и талог се узима.

- Капи центрифугираног материјала (седимент) и кап кинеског мастила или нигрозина стављају се на чисту плочицу..

- Требало би да се добро промеша и покрије поклопцем, тако да се капљица може раширити попут танког филма, а да не прелази ивице.

- Након тога се препарат монтира у микроскоп.

- Ако је препарат сувише таман, може се разриједити водом.

Извођење технике са сојевима из културе

- Веома мали део младог усева узима се са иглом за сејање и раствара у капи кинеског мастила претходно постављеног на чисту плочицу.

- Покривач се ставља на врх.

- То се види у микроскопу на 10Кс, а затим на 40Кс.

Такође можете растворити део колоније у дестилованој води, а одатле узети капљицу и помешати са мастилом. На тај начин припрема неће бити толико густа, да је могуће посматрати структуре у изолацији; Ако постоје агломерације, неће се добро посматрати.

Друга методологија је следећа:

- Ставити кап културе у суспензију на једном крају клизача.

- Ставите кап нигрозина на исти крај и помешајте.

- Уз помоћ другог слајда, продужите узорак као да радите хематолошки размаз.

- Осушите и посматрајте под микроскопом.

Посматрање у микроскопу

Прво се морате фокусирати са 10Кс циљем да имате широк поглед на поље. Након тога треба претражити ако постоје јасни простори; ако постоје, фокусирајте 40Кс да видите детаље.

Предности

- Лако је извршити.

- То је економска техника.

- Овај метод не захтева да се размаз фиксира на топлоту или хемикалије; према томе, микроорганизми се посматрају без дисторзија.

- Свјежи препарат не мора да се суши, тако да се може одмах уочити, брзо генеришући резултате.

Недостатак

Када се једном саставе, свеже препарате треба одмах посматрати; Ако им се дозволи да се осуше, више их није могуће посматрати и ново.

Бојање ткива индијским мастилом

Још једна функција коју кинеско мастило може да испуни је у лабораторијама за патологију. Ово се примењује на узорке ткива који су хируршки уклоњени како би се обележиле маргине ресекције тумора.

Означено ткиво се попрска са сирћетном киселином. Ово дјелује као мордант и спречава да се тинта испусти када се ткиво подвргне рутинској обради за припрему биопсије.

Поступак се састоји од купања ткива у алкохолу и ксилену, а затим упијања у парафински восак. Ово обележавање води патолога када посматра ткиво, указујући где је маргина хируршке ресекције или друге интересне тачке.

Референце

  1. "Нигросина". Википедиа, Тхе фрее енцицлопедиа. 11 јул 2017, 22:46 УТЦ. 6 Јан 2019, 16:56: ен.википедиа.орг
  2. "Кинеско мастило". Википедиа, Тхе фрее енцицлопедиа. Оцт 1 2018, 03:08 УТЦ. 6 Јан 2019, 18:20: ен.википедиа.орг/
  3. Силва Л, Силва Ц, Фернандез Н, Буено Ц, Торрес Ј, Рицо М, Мациас Ј и сарадници. (2006). Радно особље Аутономне заједнице Екстремадура. Специфични програм Том ИВ. Едиториал МАД. Севилле-Спаин, стр. 211-212.
  4. Силва М, Гарциа М, Цорралес Ј, Понце Е. (2006), специјалистички лабораторијски техничар Галицијске здравствене службе (СЕРГАС). Предмет специфичан волумен 2. Уводник МАД. Севилле-Спаин, стр. 79-80.
  5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. 2009. Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник