Шта је Симпле Стаининг? Топ Феатурес



Тхе једноставно бојење је брза и једноставна процедура бојења у којој се користи једна боја, због чега се назива једноставна. Углавном се користи за одређивање морфологије и организације ћелија присутних у узорку.

Наравно, ћелије немају боју, па је неопходно да их на неки начин видимо када их посматрамо у микроскопу.

Важно је нагласити да боје које се користе у једноставном бојању морају бити базичне са позитивним набојем (катионски), тако да се могу спонтано везати за ћелијски зид и цитоплазму..

Ове ћелијске структуре су негативно набијене. Зато се боја, позитивно набијена, привлачи ћелијама и спонтано се веже за њих. Тако су све ћелије присутне у узорку брзо обојене.

Боје се користе у једноставном бојању

Постоји неколико основних боја које се могу користити у микробиолошкој лабораторији. Највише се користе:

- Метхилене блуе.

- Цристал виолет.

- Малахитна зелена.

- Басиц фуцхсин.

Све ове боје добро раде у бактеријама јер имају позитивно наелектрисане (катионске) обојене јоне (хромофоре).

Време бојења за већину ових боја је релативно кратко. Обично се крећу од 30 секунди до 2 минута, у зависности од афинитета боје.

Важно је имати на уму да се прије бојења узорка једноставним бојањем мора проширити и фиксирати на стаклену плочицу (клизач); Проширени и фиксни узорак назива се размаз.

6 корака за обављање једноставног бојења

Корак 1

Поставите клизач на сталак за бојење и нанесите жељену боју. Оставите одговарајуће време.

Обично, једноставно бојење траје неколико секунди или неколико минута, у зависности од боје која се користи.

Обсерватион

У овом кораку је важно да се не прекорачи препоручено време за коришћену боју, пошто се кристали могу формирати на листу, производећи такозване "артефакте" који искривљују морфологију ћелија..

Корак 2

Пажљиво исперите мрљу клизањем дестилованом водом из боце или водом из славине која тече полако, док отицање не постане транспарентно. То обично траје 5 до 10 секунди.

Обсерватион

Не наносите водени ток директно на размаз, како бисте спријечили оштећење узорка.

Ако немате дестиловану воду, можете користити воду из славине без икаквих проблема јер то неће утицати на резултат бојења.

Корак 3

Осушите клизач са упијајућим папирним убрусима у једном смеру и без трљања. Уверите се да је доњи део слајда чист.

Корак 4

Посматрајте обојени размаз у микроскопу. Почните са најудаљенијим циљевима како бисте тачно лоцирали област коју желите да детаљније посматрате. Промените циљ да се приближите и приближите узорку.

Обсерватион

За употребу објектива са највећим увећањем (нормално 100Кс) треба користити уље за урањање, јер помаже да светлост боље продре, а слика оштрија. Није потребно користити покривало.

Корак 5

Коначно, одбаците све узорке у одговарајући контејнер који је прописно означен као "биохазард".

Референце

  1. (2001). Микробиолошке примене: Лабораторијски приручник у општој микробиологији (8 тх ед.). МцГрав-Хилл компаније.
  2. Харисха, С. (2006). Увод у практичну биотехнологију (1ст). Фиревалл Медиа.
  3. Моиес, Р. Б., Реинолдс, Ј., & Бреаквелл, Д.П. (2009). Прелиминарно бојење бактерија: Једноставне мрље. Актуелни протоколи у микробиологији, (СУППЛ 15), 1-5.
  4. Поммервилле, Ј. (2013). Алцамо'с Лаборатори Фундаменталс оф Мицробиологи (10тх). Јонес & Бартлетт Леарнинг.
  5. Пресцотт, Х. (2002). Лабораторијске вежбе из микробиологије (5 тх). МцГрав-Хилл компаније.
  6. Сумбали, Г. и Мехротра, Р. (2009). Принципи микробиологије (1ст). Тата МцГрав-Хилл Образование.