Соја бујон триптицасеина темељ, припрема и употреба

Тхе сои бротх триптицасеина То је течни медијум за културу, веома хранљив и неселективан. Због своје велике разноврсности, она је једна од најчешће коришћених течних култура у микробиолошкој лабораторији.

Познат је и као бујон триптицаса соја или дигестиран казеин-соја, чија је скраћеница ТСБ за акроним на енглеском Триптик сам Бујон или ЦСТ за акроним на шпанском. Његова употреба је веома разнолика због свог састава. Састоји се од трипеина, сојиног пептона, натријум хлорида, дикалијум фосфата и глукозе.

Способан је да репродукује клинички значајне патогене бактерије, укључујући и оне које су нутриционистички захтјевне и анаеробне бактерије. Неке опортунистичке гљивице и загађивачи се такође могу развити у овом окружењу.

Због своје високе нутритивне снаге има високу осетљивост да детектује микробиолошку контаминацију, због тога је изабрана од стране УСДА Инспектората за заштиту животиња и биљака за микробиолошку анализу вакцина..

Исто тако, триптиказа сојина супа испуњава захтеве различитих фармакопеја (европски ЕП, јапански ЈП и северноамерички УСП) за микробиолошка испитивања производа на индустријском нивоу, као што су козметика и храна.

С друге стране, вреди напоменути да је, упркос великој корисности, овај медиј релативно јефтин, тако да је приступачан за већину микробиолошких лабораторија. Такође се веома лако припрема.

Индек

• 1 Фоундатион
• 2 Припрема
  • 2.1 Сојина триптицамина
  • 2.2 - Варијанти триптикасеин сојиног бујона
• 3 Користите
• 4 Сеедед
• 5 Контрола квалитета
• 6 Ограничења
• 7 Референце

Фоундатион

Триптеина, пептоне и глукоза пружају му основне нутритивне особине како би га претворили у идеалан медиј за брз развој микроба..

Приближно 6 до 8 сати инкубације може се већ видети раст у већини микроорганизама. Међутим, постоје споро растући сојеви који могу да трају данима да расту.

Натријум-хлорид и дикалијум-фосфат делују као осмотска равнотежа и пХ регулатор. Присуство раста је доказано појавом замућености у медију; ако нема раста, медијум остаје прозиран.

Због своје светле боје могуће је посматрати производњу пигмената, као што је онај приказан на слици која се налази на почетку артикла, што одговара пигменту који производи пигмент Псеудомонас аеругиноса. 

Препаратион

-Триптиц соибеан бротх

Да би се припремио сојин бујон триптиказе, измерити 30 грама дехидрираног комерцијалног медија на дигиталној скали. Затим се раствара у литри дестиловане воде садржане у фиоли.

Смеша је остављена да стоји 5 минута и затим је доведена до извора топлоте да помогне у растварању подлоге. Требало би да се често тресу док кључа 1 минут.

Када је растворен, дистрибуира се у епрувете одговарајуће величине по потреби. Могу се користити цијеви с памучним чепом или бакелитним чеповима. Затим се епрувете стерилизују са медијумом у аутоклаву на 121 ° Ц током 15 минута.

ПХ медијума треба да буде 7,3 ± 0,2

Треба узети у обзир да је боја дехидрираног медијума за културу светло беж и да се чува на 10 до 35 ° Ц, на сувом месту. Док је прилог припремљен светло ћилибарски и треба га чувати у фрижидеру (2 до 8 ° Ц).

-Варијације триптикасеин сојиног бујона

Триптикамин модификован сојин бујон може се припремити додавањем жучних соли и новобиоцина како би био селективан за изолацију Е. цоли. Друга могућност за исту сврху је припрема триптиказа сојиног бујона допуњеног ванкомицином, цефиксимом и телуритом (2,5 μг / мл)..

С друге стране, више глукозе (0.25%) се може додати у сојин бујон триптикасеина када је циљ стимулисање формирања биофилма..

Усе

То је довољно храњиво да омогући раст захтјевних или досадних бактерија као што је Стрептоцоццус пнеумониае, Стрептоцоццус сп и Бруцелла сп, нема потребе за додатком крви или серума.

Исто тако, неке гљивице се могу развити у овој јухи, као што је Комплекс Цандида албицанс, Аспергиллус сп е Хистопласма цапсулатум.

Поред тога, овај медиј у анаеробним условима је идеалан за опоравак бактерија које припадају роду Цлостридиум, као и анаеробне не-спорулиране бактерије од клиничког значаја..

Ако се дода 6,5% натријум хлорида може се користити за раст Ентероцоццус и друге Стрептоцоццус групе Д.

На истраживачком нивоу, био је веома користан у разним протоколима, посебно у истраживању бактерија које формирају биофилмове или биофилмове. Такође се користи за припрему бактеријске суспензије на 0,5% Мац Фарланда неопходног за обављање антибиограма методом Кирби и Бауер..

У овом случају, узете су 3 до 5 колонија сличног изгледа и емулговане у 4-5 мл триптикасеин сојиног бујона. Затим се инкубира 2 до 6 сати на 35-37 ° Ц и затим се подешава на жељену концентрацију коришћењем стерилног физиолошког раствора. Триптиказа сојин бујон не би требало да се користи 18 до 24 сата инкубације.

Совн

Узорак се може сијати директно или субкултурирати чистим колонијама узетим из селективних медија. Инокулум треба да буде мали да не би замаглио медијум пре инкубације.

Нормално се инкубира на 37 ° Ц у аеробиози 24 сата, али ови услови могу да варирају у зависности од траженог микроорганизма. Може се инкубирати у анаеробним условима на 37 ° Ц неколико дана ако је потребно. На пример, у захтевним или споро растућим микроорганизмима може се инкубирати до 7 дана.

У микробиолошкој анализи фармацеутских супстанци - као што су вакцине - протоколи су строжи. У овим случајевима, бујон без раста се не одбацује све док не достигне 14 дана континуиране инкубације.

Контрола квалитета

За сваку припремљену шаржу, 1 или 2 епрувете треба инкубирати без инокулације да би се показала стерилност. Мора остати непромењена.

Такође можете да засадите познате сојеве да бисте проценили њихово понашање. Међу сојевима који се могу користити су:

Аспергиллус брасилиенсис АТЦЦ 1604, Цандида албицанс АТЦЦ 10231, Бациллус субтилис АТЦЦ 6633, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538 или 25923, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 8739,  Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 6305, Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 9027, Салмонелла типхимуриум АТЦЦ 14028.

У свим случајевима раст мора бити задовољавајући у условима атмосфере и температуре погодне за сваки микроорганизам.

Ограничења

-Ферментација глукозе узрокује смањење пХ медија производњом киселина. То може бити неповољно за преживљавање неких микроорганизама осјетљивих на киселост.

-Не препоручује се за одржавање сојева, јер поред киселости, бактерије након неколико дана исцрпљују хранљиве материје, што резултира накупљањем токсичних супстанци које чине околину негостољубивом..

-Мора се водити рачуна о свим протоколима стерилности, јер су јухе лако контаминиране.

-После припреме триптикасеин сојиних бујона не покушавајте да пребаците бујон у другу стерилну тубу, јер је овај тип маневара веома осетљив на контаминацију.

Референце

1. Цона Е. Услови за добру студију осетљивости тестом дифузије агара. Рев. цхил. инфецтол 2002; 19 (2): 77-81. Доступно на: сциело.орг
2. Бритисх Лаборатори Тритеине соиа бротх. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
3. МЦД Лаборатори. Тритица сои бротх. Доступно на: елецтрониц-системс.цом
4. Неоген лабораторија. Сои Бротх Триптицх. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Едиториал Панамерицана С.А. Аргентина.
6. Ројас Т, Васкуез И, Реиес Д, Мартинез Ц, Медина Л. Евалуација технике магнетне имуноспарације за опоравак Есцхерицхиа цоли О157: Х7 у кремама за млеко. АЛАН. 2006; 56 (3): 257-264. Доступно на: сциело.орг.ве
7. Гил М, Мерцхан К, Куеведо Г, Санцхез А, Ницита Г, Ројас Т, Санцхез Ј, Финол М. Формирање биофилма у изолацији Стапхилоцоццус ауреус према антимикробној осетљивости и клиничкој провенијенцији. Витае 2015; 62 (1): 1-8. Доступно на: сабер.уцв.ве
8. Нарваез-Браво Ц, Царруио-Нунез Г, Морено М, Родас-Гонзалез А, Хоет А, Виттум Т. Есцхерицхиа цоли О157: Х7 у узорцима столице двоструке намјене говеда говеда из општине Миранда, држава Зулиа, Венецуела. Рев. Циент. (Марацаибо), 2007; 17 (3): 239-245. Доступно на: сциело.орг