Свијетло зелени агар темељ, припрема и употреба



Тхе светло зелени агар то је чврсти медијум културе, са високим степеном селективности. Користи се искључиво за изолацију сојева рода Салмонелла, међутим постоје и изузеци, као што су врсте тајфија и паратифи које не расту у овом медију..

Потрага за родом Салмонелла је честа у узорцима фецеса, воде или хране. У том смислу, овај медиј може бити веома користан. Овај агар су 1925. године створили Кристенсен, Лестер и Јургенс, касније модификовани од стране Кауффманна.

Састоји се од плурипептонас из пептичког варења животињског ткива и панкреасне дигестије казеина, садржи и екстракт квасца, натријум клорид, лактозу, сахарозу, фенол црвену, светло зелену и агар-агар..

Карактерише је као веома негостољубив медиј за већину бактерија, фаворизујући раст салмонеле, међутим неки колиформи могу да опстану у њему, развијајући се слабо.

Важно је нагласити да у овом медију род рода Схигелла не расте и ни један Салмонелла типхимуриум, ни Салмонелла паратипхи. Према томе, ако се жели изоловати ове микроорганизме, треба користити и друга средства, као што је КСЛД агар, између осталог..

Индек

  • 1 Фоундатион
    • 1.1 Јарко зелени агар
    • 1.2 Варијанте светло зеленог агара (БГА)
  • 2 Припрема
  • 3 Употреба / апликације
  • 4 Контрола квалитета
  • 5 Референце

Фоундатион

Светло зелени агар

Свака од компоненти које чине медиј има специфичну функцију која одређује карактеристике и својства агара.

Плурипептонас и екстракт квасца су извор хранљивих материја из којих микроорганизми узимају азот и минерале потребне за њихов развој. Лактоза и сахароза су извори енергије за микроорганизме који их могу ферментисати.

Свијетло зелена је инхибирајућа супстанца која спречава развој Грам-позитивних бактерија и велики број Грам-негативних микроорганизама..

Натријум-хлорид даје медијуму осмотску стабилност. Док је фенол црвени индикатор пХ, он постаје боја када детектује производњу киселина из ферментације угљених хидрата.

Не-ферментирајуће колоније лактозе и сахарозе расту у овом медију беле боје, ружичасте или транспарентне, на црвеној позадини. На пример, бактерије рода Салмонелла.

Док бактерије лактозе или сахароза могу да расту у овом медију, оне развијају зеленкасто-жуте или зеленкасто-жуте колоније на жуто-зеленој позадини. На пример, Есцхерицхиа цоли и Клебсиелла пнеумониае.

Варијанте светло зеленог агара (БГА) \ т

Постоје и друге варијанте јарко зеленог агара; новобиоцин зелени агар светли глукоза (НБГ) и новобиоцин агар светло зелени глицерол лактоза (НБГЛ).

Новобиоцин агар светло зелена глукоза (НБГ)

Садржи сојин агар триптиказе, фери амонијум цитрат, натријум тиосулфат пентахидрат, фенол црвени, глукоза, светло зелена, новобиоцин и дестилована вода.

Служи за изолацију колонија салмонеле из узорака столице.

У овом случају, светло зелена и новобиоцин су инхибирајуће супстанце које спречавају раст Грам позитивних бактерија и неких Грам негативних микроорганизама..

Натријум тиосулфат је извор сумпора, а фери-цитрат је извор гвожђа, и неопходан за откривање производње сумпороводика кроз формирање црног талога сулфатног гвожђа.

Глукоза је ферментабилни угљикохидрат, а фенол црвени је пХ индикатор.

У овом медију колоније салмонеле развијају се велике са црним центром окруженим црвенкастим ауреолом, а иза њега је јасно видљива област. Неки сојеви Цитробацтер фреундии производе колоније идентичне Салмонели.

Светло зелени новобиоцин агар глицерол лактоза (НБГЛ)

Овај медијум садржи сојин агар триптиказе, амонијум-цитрат гвожђа, натријум тиосулфат, лактозу, глицерол, светло зелену, новобиоцин и дестиловану воду..

Разлика овог медија са претходном је да се глукоза замењује лактозом, а глицерол и фенол црвени се не користи.

Медијум се такође користи за изолацију врста Салмонелла, колоније се развијају црном, производњом сумпороводика.

Само колоније које не производе киселину из глицерола или лактозе постижу производњу Х2То је довољно, јер ниски пХ омета формирање Х2Ово резултира безбојним колонијама за већину врста Протеус и Цитробацтер.

Препаратион

-Измерити 58 грама комерцијално добијеног дехидрираног медијума. Додати у литру двоструко дестиловане воде. Мешати, оставити неколико минута и припремити препарат до извора топлоте док се не раствори у потпуности.

-Аутоклаву на 121 ° Ц у трајању од 15 минута, не прелазите време стерилизације.

-Нека стоје и служе још вруће у стерилним Петријевим посудама. Крајњи пХ треба да буде 6,9 ± 0,2.

-Оставити да се очврсне и чувати у фрижидеру до употребе. Пре засађивања плоче би требало да заузимају собну температуру.

-Средство у праху је зелено и спремно за узимање наранџасто-смеђе или црвенкасто-зелене боје, у зависности од пХ вредности и комерцијалне куће. Веома смеђа боја указује да је агар прегрејан.

-Када се агар учврсти, не препоручује се прерада, јер се медијум погоршава.

Користи / апликације

Овај медијум се користи за претраживање сојева рода Салмонелла из узорака столице и млијечних производа, између осталог..

Пошто се ради о прилично негостољубивом окружењу, препоручљиво је посадити обилан инокулум ако се користи директни узорак. У супротном, претходно обогаћивање и обогаћивање узорака треба обавити прије садње у овом медију.

Пошто се неки сојеви салмонеле тешко инхибирају или расту, препоручује се да се прати овај медиј са другим селективним агарима за салмонелу.

Све колоније са карактеристичном салмонелом морају бити подвргнуте биохемијским тестовима за дефинитивну идентификацију.

Контрола квалитета

Да би се тестирало добро функционисање светлозелене агарске средине, АТЦЦ сојеви се могу користити за посматрање развоја истих на њему..

Најчешћи сојеви који се користе за контролу квалитета су: Салмонелла ентеритидис АТЦЦ 13076, Салмонелла типхимуриум АТЦЦ 14028, Протеус мирабилис АТЦЦ 43071, Клебсиелла пнеумониае АТЦЦ 700603, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922,  Схигелла флекнери АТЦЦ 12022, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538.

Прве 3 морају дати ружичасте или транспарентне бијеле колоније на црвеној позадини. Салмонела са добрим развојем и Протеус са ретким или правилним растом.

Клебсиелла и Есцхерицхиа се очекују жућкасто-жуте колоније са жутом позадином иу случају Схигелла и Стапхилоцоццус треба инхибирати.

Дехидрирани медијум треба чувати на собној температури, на сухом мјесту, јер је медиј врло хигроскопан.

Референце

  1. Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо Лаборатори С.А. Бриллиант Греен Агар. 2009
  2. Бритисх Лаборатори Бригхт Греен Агар. 2015.
  3. БД Лаборатори. БД Бриллиант Греен Агар. 2013.
  4. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, Уводник Панамерицана С.А..
  5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. 2009. Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник