Агар ТЦБС темељ, припрема и употреба

Тхе ТЦБС агар је високо селективна и диференцијална чврста подлога за културу, која се користи за изолацију и културу Вибрио бактерија, нарочито Вибрио цхолерае, В. вулнифицус и В. парахаемолитицус као главни патогени овог рода.

Акроним ТЦБС означава тиосулфат цитратни жуч сахароза. Овај агар је такође познат као селективни медијум за Вибриос. Оригиналну формулу створио је Наканисхи, а касније је модификовао Кобаиасхи.

Састављен је од екстракта квасца, месног пептона, триптина, натријум цитрата, натријум тиосулфата, вола жучи, сахарозе, натријум хлорида, фери цитрата, бромотимол плавог, тимол плавог и агара.

Ова композиција омогућава адекватан развој врста Вибрио из воде, фецеса и узорака хране; осим Вибрио холлисае, која не расте у овом медију. Поред тога, ТЦБС медијум је способан да инхибира раст других пратећих бактерија, посебно колиформа.

Због тешких гастроинтестиналних и екстра-интестиналних проблема које неке врсте рода Вибрио производе, њихова дијагноза је веома важна. Људи су углавном инфицирани конзумирањем сирове или недовољно куване морске хране или контаминиране воде, али и кроз инфекцију рана..

Због тога, клиничке лабораторије треба да укључе ТЦБС агар у проучавању култура столице течних узорака столице, посебно са појавом воде риже. Поготово ако пацијент пријави да је био у контакту са морском водом или да је конзумирао морску храну или рибу.

Индек

• 1 Фоундатион
• 2 Припрема
• 3 Користите
• 4 Сеедед
• 5 Ограничење
• 6 Контрола квалитета
• 7 Референце

Фоундатион

Екстракт квасца, месни пептони и триптин су нутритивни извор овог медија. Међутим, ТЦБС агар је негостољубиви медиј за већину бактерија.

Његова висока селективност се даје додавањем натријум цитрата и вола жучи; оба су инхибиторски агенси који такође обезбеђују алкални пХ медијуму, ограничавајући раст пратеће флоре и погодујући расту В. цхолерае, међу осталим врстама. Треба напоменути да Вибрио цхолерае Веома је осетљив на жгаравицу.

Са своје стране, натријум хлорид се балансира осмотски на медијум. Поред тога, како је његова концентрација висока, она такође делује као инхибирајуће средство, фаворизујући раст халофилних бактерија.

Сахароза је ферментабилни шећер који заједно са плавим пХ индикаторима бромотимола и тимол плавог дају диференцијални карактер средству. Из тог разлога, на овај начин, могуће је разликовати сојеве ферментације сахарозом од не-ферментирајућих сојева.

Колоније сојева за ферментацију сахарозом развијају жуту боју и претвараће медијум из зелене у жуту због производње киселина. Не ферментори постају прозирни, а медијум остаје оригинална боја (зелена).

Исто тако, овај медијум садржи натријум тиосулфат као извор сумпора и фери-цитрат као средство за откривање. Оба показују бактерије способне за производњу водоник-сулфида (безбојни гас). Тхе Х₂С настаје из тиосулфата, а касније реакцијом са фери-цитратом формира се видљиви црни талог.

Коначно, агар је оно што даје чврсту конзистенцију медију.

Препаратион

Измерити 89 г дехидрираног медијума и растворити у једном литру дестиловане воде. Помоћ растварању загревањем и честим мешањем. Мешавина се може кувати 2 минута.

Овај медијум не аутоклавира. После његовог растварања, он се сервира директно на стерилним плочама. Када се учврсте, оне се распоређују на обрнут начин у плакете и чувају у фрижидеру (2-8 ° Ц) док се не користе.

Медиј након припреме треба да буде на пХ 8,6 ± 0,2.

Боја дехидрираног медија је свијетло беж или зеленкасто-беж, а боја медија је шумски зелена или плавичасто зелена.

Важно је оставити темперирање плоча прије сијања узорака.

Усе

Најчешћи узорак за изолацију Вибриоса је дијареична столица.

Узорци столице, ако се не могу одмах засадити на селективној подлози, морају се транспортовати у средини Цари Блаира.

Да би се повећала осетљивост културе, фецес се може пропуштати кроз пептонску воду при пХ 8,4 као медијум за обогаћивање максимално 8 сати, одатле се гаји у ТЦБС медијум..

Такође треба имати на уму да неки сојеви Вибриоса могу изазвати септикемију код пацијената са имуносупресијом, тако да се могу изоловати из крвних култура. Исто тако, узорци воде и хране из мора могу се анализирати када се појаве епидемије епидемије колере.

Совн

Инокулум узорка који се испитује мора бити истакнут, сијање се врши методом исцрпљивања. Плоче се инкубирају на 37 ° Ц током 24 сата у аеробиози.

Претпостављене колоније Вибрио цхолерае Средње су величине, глатке, непрозирне, са танким рубовима и жуте јер ферментирају сахарозу..

На сличан начин, врста В. алгинолитицус, В. флувиалис, В. хареии, В. цинциннатиенсис, В. фурниссии, В. метсцхниковии и неке В. вулнифицус. Остале врсте Вибриоса су клинички значајне као В. парахаемолитицус не ферментисати сахарозу, развијајући се као маслинове зелене колоније.

С друге стране, морамо имати на уму да неки сојеви Аеромона и Плесиомона који су оксидаза (+) могу расти у овом медију, развијајући жуте колоније које могу збунити клиничара. Док неки сојеви Псеудомонас такође оксидазе (+) расту као зелене колоније као и В. парахаемолитицус.

Ограничење

Тест оксидазе који је позитиван за род Вибрио никада не треба да се изводи из колонија добијених из ТЦБС агара, јер ће добијени резултат бити лажно негативан. Једињења у медијуму снажно утичу на овај тест. Према томе, то треба урадити из субкултура на крвном агару.

Контрола квалитета

Да би се доказало да је медијум у добром стању, препоручљиво је засадити познате или сертификоване контролне сојеве и посматрати да ли раст задовољава очекиване карактеристике.

За ово, напрезање:

-Вибрио цхолерае - Задовољавајући раст (жуте колоније, прозирне границе).

-Вибрио парахаемолитицус - Задовољавајући раст (колонија са зеленим центром и прозирном границом).

-Вибрио алгинолитицус АТЦЦ 17749 - задовољавајући раст (жуте колоније са ореолима исте боје око колоније).

-Ентероцоццус фаецалис АТЦЦ 29212 - укупна или делимична инхибиција (мале жуте или прозирне колоније).

-Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 27853 - дјеломична или потпуна инхибиција (плаве колоније).

-Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922 - Потпуно инхибиран.

-Протеус мирабилис АТЦЦ 43071 - Тотална или делимична инхибиција. (Центар малих колонија зелене прозирне ивице).

Инкубација неинокулираног медија не би требало да се мења.

Референце

1. Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо Лабораториес. ТЦБС агар. 2009. Доступно на: ф-сориа.ес
2. БД Лаборатори. БД. ТЦБС Агар 2003. Доступно на: бд.цом
3. Лабораториес Британиа. ТЦБС Медиум. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
4. Ацумедиа Лабораториес ТЦБС Агар. 2016. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
5. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Едиториал Панамерицана С.А. Аргентина.
6. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. 5тх ед. Едиториал Панамерицана С.А. Аргентина.