Соја агар триптицасеина темељ, припрема и употреба

Тхе триптицасеин сои агар или сојин агар триптиказе је чврсти, неселективни и хранљиви медијум за културу. Означен је са словом ТСА за акроним у енглеском Триптицасе Сои Агар. Састоји се од трипеина, сојиног пептона, натријум хлорида и агар-агара.

Због своје високе нутритивне снаге, идеалан је за узгој умерено захтјевних и незахтевних микроорганизама. Медијум без додатних суплемената се не препоручује за примарне културе, али је веома користан за субкултивацију чистих сојева и одржавање њихове одрживости, између осталог..

Такође, овај агар служи као основа за припрему обогаћених медија као што је крвни агар, посебно када је потребно да се посматрају обрасци хемолизе и да се монтирају таксони оптоквина и бацитрацина, који су потребни у дијагностици Стрептоцоццус пнеумониае и Стрептоцоццус пиогенес респективно.

С друге стране, у комбинацији са антибиотицима корисно је изоловати факултативне и строге анаеробне микроорганизме од клиничког значаја из узорака са мешаном флором..

На крају, састав триптикасеин сојиног агара и његове перформансе задовољавају захтеве које су утврдиле различите фармакопеје (европска, јапанска и северноамеричка)..

Индек

• 1 Фоундатион
• 2 Припрема
  • 2.1 Таблице са триптикасеин сојиним агарима
  • 2.2. Плоче са сојиним агарима са триптикасеином, допуњене крвљу
  • 2.3. Триптицасеин соја агар плоче допуњене са загрејаном крвљу
  • 2.4 Клинови од триптикасеин сојиног агара
• 3 Усес
• 4 Сеедед
• 5 Контрола квалитета
  • 5.1 Контрола стерилности
  • 5.2 Контрола раста
  • 5.3 Контрола раста и обрасца хемолизе сојиног агара триптикасеина допуњеног крвљу
• 6 Референце

Фоундатион

За правилан развој бактерија неопходно је присуство енергетских доприноса, као што су аминокиселине, витамини, пуринске базе и пиримидни.

У том смислу, триптин и сојин пептон обезбеђују ове хранљиве састојке микроорганизмима, што омогућава њихов потпуни развој. Међутим, за захтевне бактерије потребно је овај агар допунити дефибринираном крви или загрејаном крвљу како би се повећало њено обогаћење.

С друге стране, ако се антибиотици додају медију, он постаје селективни медијум. Такође можете додати 0,6% екстракта квасца како би се олакшала изолација врста рода Листериа, уз додавање цистинског телурита и Јагњећа крв је идеална за Цоринебацтериум дипхтериае.

Коначно, натријум хлорид даје осмотску равнотежу медијуму и агар даје чврсту конзистенцију.

Препаратион

Таблице са сојиним агарима триптикасеина

Да би се припремио агар са сојином триптикасеина, 40 грама дехидрираног комерцијалног медијума би требало проценити на дигиталној скали. Раствара се у литри дестиловане воде садржане у фиоли.

Смеша је остављена да стоји 5 минута и затим је доведена до извора топлоте да помогне у растварању подлоге. Често је треба мешати и оставити да прокува 1 или 2 минута. Затим се медијум стерилише у аутоклаву на 121 ° Ц током 15 минута.

Оставити да се охлади на 50 ° Ц и распоредити у стерилне Петријеве посуде. Нека се стврдне, обрће, наручи у плакете и чува у фрижидеру.

Коначни пХ средине треба да буде 7,3 ± 0,2.

Треба узети у обзир да је боја дехидрираног медијума за културу светло беж и да се чува на температури од 10 до 35 ° Ц, на сувом месту.

Са своје стране, припремљени агар је светло-ћилибар. Припремљене плоче треба чувати у фрижидеру (2 до 8 ° Ц) до употребе.

Плоче морају да достигну собну температуру пре употребе.

Плоче са сојиним агарима са триптикасеином допуњене крвљу

Крвни агар је припремљен додавањем 5% дефибриниране крви у време хлађења триптикасеин сојиног агара на 50 ° Ц. Мешавина се хомогенизује ротирањем са благим покретима.

Сервирајте у стерилним Петријевим посудама. Боја медија треба да буде црвена.

Плоче са сојиним агарима са триптикасеином, допуњене са загрејаном крвљу

Да би се припремио крвни агар базиран на ТСА, горе описане процедуре су исте, али када се напусти аутоклав остави се да стоји док температура медијума не буде приближно између 56 и 70 ° Ц. У то време крв се ставља и меша све док средина не постане браон.

Послужите у стерилним Петријевим посудама. Боја медија је чоколадно браон.

Клинови од триптикасеин сојиног агара

Поступак за припрему агара је исти као и за плоче, с тим да се умјесто да се служи медиј на Петријевим посудама, дистрибуира између 10 и 12 мл у епрувете са бакелитним поклопцем прије стерилизације..

Затим се епрувете аутоклавирају на 121 ° Ц током 15 минута. Када одлазе, ослањају се уз помоћ потпоре и допуштају да се стврдну.

Припремљени клинови се сијају по површини и служе за одржавање одређених незахтевних живих микроорганизама, током одређеног времена.

Усес

Триптицасеин соја агар се користи у следећим случајевима:

-Као база за припрему класичног крвног агара који се рутински користи у већини лабораторија.

-Изолација захтевних бактерија.

-Посматрање обрасца хемолизе.

-Извођење дијагностичких тестова.

-Као основа за припрему специјалног крвног агара Цоринебацтериум дипхтериае, са телистровим цистином и Јагњећа крв.

-Као основа за припрему јагњећег крвног агара, више канамицин-ванкомицина за раст анаеробова, посебно Бацтероидес сп.

-За одржавање незахтевних сојева (Бацтериотеца).

-Број микроба у аеробној анализи у микробној студији воде, животне средине, хране и козметичких узорака.

Совн

Узорци се могу сијати директно на површину триптикасеин сојиног агара допуњеног крвљу или другим адитивима. Сије се исцрпљењем.

Будући да се плоче агар триптикасеин соје без адитива обично користе за субкултуру микробних сојева (бактерија или квасац).

Контрола квалитета

Контрола стерилности

Да би се проверила стерилност различитих подлога припремљених са агенсом триптицасеин соје, препоручује се следеће: од сваке припремљене шарже, једну или две плоче или епрувете треба инкубирати без инокулације на 37 ° Ц током 24 сата да се покаже стерилност. У свим случајевима мора остати без раста.

Ако се пронађе контаминација, цела група мора бити одбачена.

Контрола раста

За проучавање правилног функционисања триптикасеин сојиног агара могу се користити следећи бактеријски сојеви: Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 8739, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 6538, Псеудомонас аеругиоса АТЦЦ 9027 и Ентероцоццус фаецалис АТЦЦ 29212.

Сојеви се сијају и инкубирају у аеробиози на 37 ° Ц током 24 сата.

У свим случајевима раст мора бити задовољавајући.

Можете користити и гљиве као комплекс Цандида албицанс АТЦЦ 10231 анд Аспергиллус нигер АТЦЦ 16404. Очекује се добар раст за оба соја.

Контрола раста и узорак хемолизе сојиног агара триптикасеина допуњен крвљу

Да би се проверило исправно функционисање крвног агара припремљеног са овом базом, могу се користити следећи сојеви: Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 6305 анд Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 49619.

Они су посејани и инкубирани на 37 ° Ц у микроаерофилику током 24 сата.

У свим случајевима, раст мора бити задовољавајући, узимајући у обзир то у С. пиогенес бета-хемолиза (бистар хало око колоније) и код оба соја С. пнеумониае алфа хемолиза (зеленкасто ореол око колонија).

Референце

1. Википедиа цонтрибуторс. Триптицасе Ја сам агар. Википедиа, Тхе Фрее Енцицлопедиа. Децембар 17, 2018, 15:47 УТЦ. Доступно на: хттпс://ен.википедиа.орг
2. Лабораториес Британиа. Тритеине сои агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
3. Неоген Лабораториес Соибеан триптицх. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
4. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник.
5. БД Лабораториес Триптицасе Ја сам Агар. 2014. Доступно на: .бд.цом