Храњива подлога агара, припрема и употреба



Тхе храњив агар то је неселективна и не-диференцијална чврста подлога за културу. У овој средини расту све врсте бактерија које не захтевају нутриционистичко гледиште.

То је једноставно средство и, упркос свом називу, садржи мању хранљиву вредност у поређењу са другим сличним медијима, као што су агар за инфузију мозга или триптиказа сојин агар..

Његова корисност у лабораторији је веома различита. Углавном се користи за субкултуру врста, одржавање сојева, бројање колонија, као основа за припрему крвног агара, између осталог.

Исто тако, због своје светло беж боје, производња пигмената генерисаних од стране неких бактеријских сојева, као што је зелени пигмент Псеудомонас аеругиноса, Црвени пигмент од цигле Серратиа марцесценс на собној температури, златножути пигмент Стапхилоцоццус ауреус, између осталог.

Осим тога, то је један од најекономичнијих медија за раст који се налазе на тржишту.

Индек

  • 1 Фоундатион
  • 2 Композиција
  • 3 Припрема
  • 4 Усес
    • 4.1 Као основа за припрему крвног агара
    • 4.2 Стимулисати спорулацију бактерија које стварају споре
    • 4.3 Одржавање деформације
    • 4.4 Бројање колонија
    • 4.5 Извођење дијагностичких тестова
    • 4.6 Опоравак мезофилних аеробних рекреативних сланих вода (Плаже)
  • 5 Референце

Фоундатион

Као што је већ поменуто, то је веома једноставно средство које се заснива на обезбеђивању нутритивних супстанци за раст бактерија без ограничења и без комплексних реакција за тумачење..

Пошто је медијум провидан, идеалан је за бројање колонија методом сетве по дубини.

Цомпоситион

Углавном се састоји од екстракта меса или екстракта квасца, пептона или дигестије желатине панкреаса, агар-агара, натријум хлорида и дестиловане воде..

Екстракт меса или квасца и пептона представља извор угљеника и есенцијалних минерала (азот, фосфор и сумпор), који ће бактерије користити као извор енергије и факторе раста..

Исто тако, агар-агар је основа свих чврстих растућих подлога, замењујући желатин, који је био прво базно једињење које је користио Роберт Коцх да даје чврсту конзистенцију у његовом медију..

Агар је полисахарид састављен од галактозе, галактоманана, агарозе и агаропецтина. Подешава се на 40 ° Ц и топи се близу 100 ° Ц.

Са своје стране, натријум хлорид обезбеђује медијум осмоларност неопходну за развој бактерија.

Коначно, вода служи за хидратацију и растварање лиофилизованих једињења. Треба користити дестиловану воду подешену на неутрални пХ. Вода из славине не треба користити јер садржи калцијум и магнезијум који могу реаговати са фосфатима у средству и формирати нерастворљиве соли..

Препаратион

За један литар хранљивог агара, треба извагати 31 г дехидрираног медија. Стави се у фиолу и раствори у литри дестиловане воде. Након 5 минута одмора, загрејте преко извора топлоте и стално мешајте док не прокуха 1 или 2 минута.

Затим ставите фиолу у аутоклав и стерилизујте на 121 ° Ц током 20 минута.

На крају времена, она се уклања из аутоклава и сервира у стерилним Петријевим посудама, користећи ламинарни поклопац протока или Бунсен пламеник..

Ако је Петријева посуда за једнократну употребу (пластична), медиј треба да се расподели када температура агара има приближно 50 ° Ц, како би се спречило њихово деформисање услед прекомерне топлоте..

Оставити да се стврдне и ускладиштити у држачу плоче који је обрнут и чувати у фрижидеру на 2-8 ° Ц до употребе.

Плоче морају бити каљене прије сијања. Храњиве плоче агара не смију се користити ако су онечишћене или дехидриране.

ПХ припремљеног медија треба подесити на 7,3 ± 0,2.

Усес

То је најједноставнији медијум за културу који се користи у микробиолошкој лабораторији. Његова формулација је одлична за раст непотребних бактерија.

Његове главне употребе су објашњене у наставку:

Као база за припрему крвног агара

Овај медиј се понекад користи као база за припрему крвног агара, али то није најчешће коришћена база.

Стимулисати спорулацију бактерија које стварају споре

Ова подлога за културу је посебно корисна за стимулацију спорулације бактерија које формирају споре, као што су Бациллус сп.

Да би се то постигло, засијава се род рода Бациллус и инкубира 24 сата на 37 ° Ц у аеробиози. Када се колоније узгајају, плоча се подвргава напрезању температуром, тј. Температура пећи се повећава на 44 ° Ц и оставља 24 сата више или се уводи у фрижидер 24 сата.

На крају усева, културе су проширене и обојене са Грам бојом или Схаеффер-Фултон спорном мрљом. У њима ће се посматрати бацили са ендоспорама (споре унутар бацила) и ексоспоре (споре изван бацила)..

Одржавање деформације

Неке истраживачке лабораторије или универзитетски лабораторији за подршку настави морају да одржавају одрживе клинички важне бактерије што је дуже могуће, како би користили бактеријску банку (бацтериотхеца) за истраживачки рад или за припрему наставних пракси. Студенти ће научити да манипулишу и идентификују ове микроорганизме.

У ту сврху се могу користити хранљиви агар, као и агар за инфузију мозга у мозгу. Агар се припрема, сипа у епрувете са бакелитним поклопцем и нагиње на базу, тако да се агар учвршћује формирајући блок на дну и косину на површини (врх флауте)..

Свака епрувета се означава стављањем имена бактерија које ће се садити и датума. На оштрици ће свака од бактерија бити посађена и инкубирана 24 сата, када се колоније узгајају, цеви се чувају на собној температури..

Бактериотеку треба обнављати од 1 до 3 месеца, како би се избегла контаминација и дехидрација медија и смрт бактерија..

На овај начин могу се одржавати само незахтјевне бактерије.

Бројање колонија

Иако постоје специјализована средства за бројање колонија, као што је стандардни агар за бројање, у ту сврху се може користити хранљиви агар, било сијањем на површину дригалском лопатицом или дубином. Због тога је веома корисна у микробиолошкој анализи хране и воде.

Извођење дијагностичких тестова

Пошто је то медиј који не садржи крв или било који други адитив, идеално је узети колоније које се узгајају у овом медију да би се извршио тест каталазе..

Исто тако, због његове јасне боје, назначено је да се обављају оксидазни тестови директно на површини засађеног агара, без интерференције.

Опоравак мезофилних аеробних рекреативних сланих вода (Плаже)

Хранљиви агар припремљен са 10% морске воде је користан за процену мезофилних аеробова у плажним водама.

На тај начин можемо увидети ниво стварне контаминације коју ове воде имају са овим микроорганизмима, јер се у овој врсти узорака резултати преклапају када се користе културе културе припремљене на конвенционалан начин..

Ово су показали Цортез ет ал. 2013. године у истраживачком раду.

То је објашњиво због наглих промена које бактерије пролазе када прелазе из хипер-сланог окружења у околину са ниским садржајем соли, тако да микроорганизми улазе у стање летаргије у којој су одрживи, али се не могу култивисати.

Референце

  1. "Храњиви агар." Википедиа, Тхе фрее енцицлопедиа. 13 сеп 2016, 20:33 УТЦ. 29 Дец 2018, 21:04 ен.википедиа.орг
  2. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник.
  3. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, Уводник Панамерицана С.А..
  4. Цортез Ј, Руиз И, Медина Л, Валбуена О. Утицај медија културе припремљених са морском водом на здравствене показатеље у морским водама Цхицхиривицхе бање, држава Фалцон, Венецуела. Рев Соц Цоме Мицробиол 2013; 33: 122-128
  5. Паредес В, Диас В, Силва де Алмеида М и Цардосо М. Микробиолошки квалитет воде за дозе за осемењавање, за Суинос.Циент.Агро.Амаз. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. Гарциа П, Паредес Ф, Фернандез дел Баррио М. (1994). Практична клиничка микробиологија. Универзитет у Цадизу, друго издање. УЦА Публицатион Сервице.