МацЦонкеи Агар темељ, припрема и употреба

Тхе МацЦонкеи агар То је чврсти медијум културе који омогућава искључиву изолацију грам негативних бацила. Због тога је селективна подлога и омогућава разликовање између ферментних и неферментирајућих бацила лактозе, што га чини диференцијалном средином. То је једна од најчешће коришћених култура у микробиолошкој лабораторији.

Овај медиј се углавном користи за изолацију Грам негативних бацила који припадају породици Ентеробацтериацеае, укључујући опортунистичке и ентеропатогене врсте.

Може се користити и за изолацију других цријевних бацила који обитавају у гастроинтестиналном тракту, али не припадају Ентеробацтериацеае, ас Аеромонас сп, Плесиомонас сп, између осталог.

Коначно, може да изолује друге грам-негативне, не-ферментирајуће бациле глукозе које се налазе у околини, води или земљишту, али које понекад могу бити опортунистички патогени као што су Псеудомонас сп, Ацинетобацтер сп, Алкалине сп, Цхромобацтериум виолацеум, Стенотропхомонас малтопхилиа, између осталог.

Индек

• 1 Фоундатион
  • 1.1 МацЦонкеи Агар
• 2 Припрема
• 3 Употреба конвенционалног МацЦонкеи агара
• 4 Остале варијанте МацЦонкеи агара
  • 4.1 МацЦонкеи агар са сорбитолом
  • 4.2 МацЦонкеи Агар без кристалне љубичице или соли
  • 4.3 МацЦонкеи агар са цефоперазоном
  • 4.4 МацЦонкеи агар припремљен са 10% морске воде в / в
• 5 Референце

Фоундатион

МацЦонкеи Агар

Темељ овог медија може се објаснити описом његових компоненти, јер свака од њих има сврху која одређује њену особину.

Жучне соли и кристал љубичице

У том смислу, МацЦонкеи агар има комплексну композицију. Најпре садржи жучне соли и кристал љубичице.

Ови елементи су одговорни за инхибицију раста Грам-позитивних бактерија и неких захтевних грам-негативних бацила. С друге стране, то погодује развоју грам негативних бацила који нису под утицајем ових супстанци. Зато је то селективни медијум.

Каже се да је он мало селективан у поређењу са другим медијима који такође инхибирају раст Грам-позитивних бактерија, као и већине Грам-негативних бактерија..

Изузетно је селективан за специфични род, као што је ТЦБС агар за изолацију Вибрио цхолерае и друге сличне халофилне и алкалофилне врсте.

Пептони, полипектони и лактоза

Садржи супстанце које обезбеђују неопходне хранљиве материје за микроорганизме који се развијају у овом медију, као што су пептони, полипектони и лактоза.

Лактоза је кључна тачка за медијум као диференцијални медијум, јер микроорганизми који имају способност ферментације лактозе ће развити јаке ружичасте колоније.

Неке бактерије могу ферментирати лактозу полако или слабо, развијајући бледо ружичасте колоније и остају позитивне лактозе.

Они који не ферментирају лактозу користе пептоне као извор енергије, производећи амонијак, алкализујући медијум. Према томе, колоније које потичу су безбојне или транспарентне.

ПХ индикатор

Промена боје се постиже другим есенцијалним једињењем које има МацЦонкеи агар. Ово једињење је пХ индикатор, који је у овом случају неутралан црвени.

Ферментација лактозе генерише производњу мешаних киселина. Средину се закисели на пХ испод 6,8..

Ово узрокује да се пХ индикатор окрене према интензивном ружичастом тону. Интензитет боје може варирати у зависности од коначног пХ.

Дестилирана вода, натријум хлорид и агар

С друге стране, садржи дестиловану воду и натријум-хлорид, који медијуму дају хидратацију и осмотску равнотежу. Коначно, медијум садржи агар, који је база која обезбеђује конзистенцију чврстог медија.

Припремљени МацЦонкеи агар медијум мора имати коначни пХ подешен на 7.1 ± 0.2..

Препаратион

За један литар МацЦонкеи агара, 50 г дехидрираног медијума треба измерити, затим ставити у фиолу и растворити у једном литру дестиловане воде. После 10 минута одмора загрева се константним мешањем док не прокуха 1 минут.

Затим ставите фиолу у аутоклав и стерилизујте на 121 ° Ц током 20 минута. На крају времена, она је уклоњена из аутоклава и остављена да се охлади на температуру од 45 ° Ц, а затим послужена у стерилним Петријевим посудама унутар поклопца ламинарног протока или испред Бунсен пламеника..

Оставити да се стврдне и ускладиштити у држачу плоче који је обрнут и чувати у фрижидеру на 2-8 ° Ц до употребе.

Да би се добио МацЦонкеи агар који инхибира ефекат бубрења добијеног од рода Протеус, користи се МацЦонкеи агар са ниским садржајем соли..

Користи конвенционални МацЦонкеи агар

МацЦонкеи агар је укључен у све сетове медијума за културу који су уређени за сетву клиничких узорака примљених у лабораторију. Такође је користан у микробиологији хране и микробиологији животне средине.

Различити грам негативни бацили који расту у овом медију изражавају фенотипске карактеристике које помажу у претпостављеној дијагнози дотичне врсте. На пример, величина, боја, конзистенција и мирис колонија су неке од карактеристика које могу водити.

У овој средини, врсте Есцхерицхиа цоли, Клебсиелла сп и Ентеробацтер сп производе јаке ружичасте колоније, окружене подручјем преципитиране жучи.

У бактеријама Цитробацтер сп, Провиденциа сп, Серратиа сп и Хафниа сп могу се појавити без боје након 24 сата или блиједо ружичасте за 24 до 48 сати.

Исто тако, родови Протеус, Едвадсиелла, Салмонелла и Схигелла производе безбојне или транспарентне колоније.

Остале варијанте МацЦонкеи агара

Постоје и друге варијанте МацЦонкеи агара које имају специфичне сврхе. Следеће се спомињу:

МацЦонкеи агар са сорбитолом

Овај медијум је дизајниран за разликовање ентеропатогеног соја (Есцхерицхиа цоли ентерохеморрагиц О157: Х7) остатка сојева Есцхерицхиа цоли.

Овај медијум мења угљене хидрате лактозе за сорбитол. Сојеви Е. цоли ентерохеморагијски О157: Х7 се разликују од осталих зато што не ферментирају сорбитол и због тога се добијају транспарентне колоније, али остатак сојева Е. цоли ако ферментирају сорбитол и колоније су јаке ружичасте боје.

МацЦонкеи Агар без кристалне љубичице или соли

Овај агар се доста разликује од класичног МацЦонкеи агара, јер нема кристално љубичасто, Грам-позитивне бактерије могу расти.

С друге стране, одсуство соли инхибира појаву ројења на агару произведеном неким ентералним бацилима, као што су они из рода Протеус, и на тај начин олакшавају изолацију свих присутних бактерија, укључујући Грам-позитивне бактерије.

МацЦонкеи агар са цефоперазоном

Ова варијанта МацЦонкеи агара је дизајнирана да се иницијално изолује Ларибацтер хонгконгенсис а касније су схватили да је то корисно за изолацију Арцобацтер бутзлери. АОба су благо закривљена негативна Грамска бацила отпорна на цефоперазон.

Ове бактерије су недавно повезане као узроци гастроентеритиса и дијареје стечене у азијским и европским појединцима, појављујући се као два моћна патогена у настајању.

Антибиотик дозвољава да се инхибира пратећа флора гастроинтестиналног тракта, што погодује развоју ових бактерија, спречавајући да не прођу незапажено, јер им је потребно 72 сата да расту.

МацЦонкеи Агар припремљен са 10% морске воде в / в

Ова варијанта је корисна за процену бактеријских здравствених показатеља фекалне контаминације, укључујући укупне колиформе и фекалне колиформе у рекреативним сланим водама (плаже и увале)..

Цортез и сарадници 2013 су показали да медијум припремљен на овај начин значајно повећава опоравак ових микроорганизама у сланој средини, у поређењу са употребом МацЦонкеи агара припремљеног са дестилованом водом..

То је због тога што модификована средина стимулише раст бактерија које су физиолошки у стању мировања "одрживе, али не и култивисане", те се стога не могу обновити у конвенционалним медијима..

Референце

1. Лау СК, Воо ПЦ, Хуи ВТ, ет ал. Употреба цефоперазона МацЦонкеи агара за селективну изолацију Ларибацтер хонгконгенсис. Ј Цлин Мицробиол. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. "МацЦонкеи Агар." Википедиа, Тхе фрее енцицлопедиа. 4 Апр 2018, 18:16 УТЦ. 29 Дец 2018, 15:22 ен.википедиа.орг
3. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник.
4. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, Уводник Панамерицана С.А..
5. Цортез Ј, Руиз И, Медина Л, Валбуена О. Утицај медија културе припремљених са морском водом на здравствене показатеље у морским водама Цхицхиривицхе бање, држава Фалцон, Венецуела. Рев Соц Цоме Мицробиол 2013; 33: 122-128
6. Гарциа П, Паредес Ф, Фернандез дел Баррио М. (1994). Практична клиничка микробиологија. Универзитет у Цадизу, друго издање. УЦА Публицатион Сервице.