Темељ Цетримида агара, припрема, употреба



Тхе цетримиде агар или цетримид је селективни чврсти медијум културе, дизајниран за изолацију Псеудомонас аеругиноса. Она се заснива на истицању производње пигмената карактеристичних за ову врсту и развијена је из модификације Тецх агара, коју су креирали Кинг, Вард и Ранеи.

Оригинална формула садржи соли магнезијум хлорида, калијум сулфат, дигестију желатине панкреаса и агар-агар. Модификација формуле састојала се од додавања цетримида (цетил триметил амонијум бромида) и глицерола.

Цетримид агар је користан за микробиолошка испитивања узорака у којима је присутан Псеудомонас аеругиноса. Треба напоменути да је ова бактерија од велике важности, јер иако је дио нормалне микробиоте у околини, често се понаша као опортунистички патоген..

Према томе, један од најчешћих проблема које проузрокује ова клица су нозокомијалне инфекције, односно оне које се дешавају у болничком окружењу, нападају пацијенте који имају депресивни имуни систем..

С друге стране, због афинитета који овај микроорганизам има са влагом, најрањивије мете су: помоћна опрема за дисање, лијекови, небулизатори, извори воде, клима уређаји, дезинфицијенси, сапунски раствори, отопине ​​за ињекције, отворене ране , катетери, уринарни катетери, између осталих.

У том смислу, цетримидни агар је користан за обављање микробиолошких контрола и усјева према претходно именованим елементима.

Индек

  • 1 Фоундатион
    • 1.1 Тумачење
  • 2 Припрема
  • 3 Усес
  • 4 Сеедед
  • 5 Ограничења
  • 6 Контрола квалитета
  • 7 Референце

Фоундатион

Цетримид агар се заснива на способности медија да промовише раст П. аеругиноса, стимулишу производњу њихових пигмената и заузврат инхибирају раст других микроорганизама.

Ова својства су резултат функције коју свака од његових компоненти испуњава. Присутни желатин пептон служи као извор азота, витамина и минерала. Глицерол или глицерин функционише као извор угљеника.

Са своје стране, цетримид (цетил триметил амонијум бромид) је супстанца која инхибира раст других бактерија него П. аеругиноса, укључујући и друге врсте које припадају истом роду.

До инхибиције долази зато што цетрамид делује као катионски детерџент, дестабилизирајући плазматску мембрану већине бактерија, са изузетком П. аеругиноса и неки други који успевају да преживе.

С друге стране, садржи магнезијум хлорид и калијум сулфат. Ова једињења стимулишу фенотипску експресију у односу на капацитет Псеудомонас аеругиноса производње различитих пигмената, међу којима су: пиоцијанин, пиовердин, пиорубин, пиомеланин и флуоресцеин. Коначно, садржи агар-агар, који даје чврсту конзистенцију.

Тумачење

Тумачење раста добијеног у овом агару се врши на следећи начин:

Посматрање округлих, глатких колонија са правилним ивицама, које производе плаво-зелене, зелене, смеђе или црвенкасте пигменте, плус емисије воћног мириса (аминоацетофенон), је претпостављени резултат присуства ове бактерије у наведеном узорку..

С друге стране, то је индикативно П. аеругиноса посматрање светло жућкасто-зеленог пигмента на колонијама када је плоча изложена ултраљубичастом светлу.

Треба напоменути да је свака проматрана боја посљедица производње специфичног пигмента. Плаво-зелени пигмент одговара производњи пиоцијанина, зелене до пиовердина, црвенкастог до пиррубина, смеђег до пиомеланина и светло жућкасто-зелене флуоресценције под ултраљубичастом светлошћу до флуоресцеина.

Препаратион

Измерити 43 г дехидрираног медијума и растворити у дестилованој води. Додати 10 мл глицерола. Однесите смешу до извора топлоте. Пустити да прокува неколико минута до потпуног растварања.

Аутоклавујте 15 минута на 121 ° Ц. Оставите се и послужите у стерилним Петријевим посудама када је температура око 50 ° Ц.

Оставити да се очврсне, преокрене, наручи у плакете и чува у фрижидеру до употребе. Да би се засадиле плоче цетримидног агара, треба их претходно извадити из фрижидера и оставити да заузму собну температуру..

Коначни пХ медија треба да буде 7,2 ± 0,2.

Боја дехидрираног медија је беж а препарат је непрозиран.

Усес

Цетримид агар се може користити за садњу свих врста узорака у којима је присутан Псеудомонас аеругиноса. Због тога је корисна у свим областима микробиологије (еколошка, индустријска, клиничка, вода и храна).

Од велике је важности анализирати болничко окружење и на тај начин бити у могућности примијенити корективне медијације, јер овај микроорганизам долази до пацијената кроз опрему, лијекове, отопине ​​и контаминиране залихе које користи пацијент..

На овај начин, микроорганизам може заразити доњи респираторни тракт, уринарни тракт и ране код пацијената са имуносупресијом.

Бројеви колонија се такође могу направити П. аеругиноса у микробним тестовима.

Совн

Цетримид агар се може користити као примарна култура. Плоча се инокулира у један од њених ивица и одатле се испушта до остатка плоче. Течни узорци се могу сијати на површину дригалском шпатулом.

Плоче се инкубирају у аеробиози на 37 ° Ц током 24 сата инкубације.

Ограничења

-Мали проценат сојева  Псеудомонас аеругиноса не производе пиоцијанин, тако да можете интерпретирати лажно негативан.

-Неке врсте Псеудомонас од клиничког значаја су инхибиране у овом медију.

-Упркос посматрању описаних карактеристика Псеудомонас аеругиноса, они морају бити поткријепљени додатним идентификацијским тестовима. Тест који не треба да недостаје је тест оксидазе, он треба да буде позитиван.

-Неке ентеробактерије могу расти у овом медију и развити жути пигмент, али се разликује од њега Псеудомонас аеругиноса при чему при излагању плоче ултраљубичастом зрачењу нема флуоресценције.

-Серратиа марцесценс успева да развије и произведе ружичасти пигмент.

-Ако су плакови засијани са цетримидним агарима изложени током времена на собној температури, сојеви П. аеругиноса могу да изгубе флуоресценцију која се посматра под ултраљубичастим светлом, али се та особина опоравља ако се поново инкубира на 37 ° Ц.

Контрола квалитета

Да би се тестирало правилно функционисање цетримидног агара, могу се користити контролни сојеви, као што су: Псеудомонас аеругиноса АТЦЦ 9027, Стенотропхомонас малтопхилиа АТЦЦ 13637, Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922 и Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 25923.

Очекивани резултати су:

  • То П. аеругиноса добар раст, са плаво-зеленим пигментом и позитивним флуоресцеином.
  • С. малтопхилиа и С. ауреус ће бити делимично или потпуно инхибирано.
  • То се очекује Есцхерицхиа цоли бити потпуно инхибиран.

Референце

  1. Цаллицо А, Цедре Б, Сифонтес С, Торрес В, Пино И, Цаллис А, Еснард С. Фенотипска и серолошка карактеризација клиничких изолата из Псеудомонас аеругиноса. ВацциМонитор. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Лабораториес Цонда Пронадиса. База цетримид агара. 2014. Доступно на: цондалаб.цом
  3. Лабораториес Британиа. Цетримида агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
  4. БД Лабораториес БД Псеудосел агар (Цетримиде агар). 2013. Доступно на: бд.цом
  5. Францисцо Сориа Мелгуизо Лаборатори, Ц.А. Цетримиде агар. 2009. Доступно на: хттп://ф-сориа.ес