Фондација Агар БХИ, припрема и употреба

Тхе БХИ агар или агар за инфузију мозга срца је храњиви чврсти медијум за културу. На шпанском језику то називамо агар за инфузију мозга срца. То је неселективна подлога за културу, што значи да се могу развити све врсте Грам позитивних и Грам негативних бактерија, као и неке гљивице и филаментозне гљиве..

Састоји се од телеће инфузије мозга и срца, пептичног хидролизата животињских ткива, хидролизата казеина панкреаса, натријум хлорида, глукозе, динатријум фосфата и агара..

Треба напоменути да је БХИ агар један од најчешћих медија за културу у бактериолошким лабораторијама. Може се користити без додатака као примарна култура, субкултура колонија добијених у другим селективним медијима или за одржавање сојева у лабораторији.

С друге стране, то је идеалан медиј који се користи као база у припреми обогаћених медија, као што су крвни агар и чоколадни агар. Оба су идеална за изолацију захтевних микроорганизама са нутритивне тачке гледишта. Међутим, мора се узети у обзир да, будући да садржи глукозу, није адекватно посматрати обрасце хемолизе.

Слично томе, БХИ агар се може користити за припрему специјалних средстава за изолацију патогених микроорганизама тешког раста у уобичајеним медијима, међу њима: Хаемопхилус сп, Франциселла туларенсис, Цоринебацтериум дипхтхериае и Хистопласма цапсулатум.

Са додатком антибиотика БХИ агар постаје селективна подлога за изолацију гљива.

Индек

• 1 Фоундатион
• 2 Припрема
  • 2.1 Ведгес
  • 2.2 Платес
  • 2.3 Припрема крвног агара
• 3 Усес
  • 3.1 Користите без додатака
  • 3.2 Као основни агар за припрему других медија
• 4 Контрола квалитета
• 5 Референце

Фоундатион

То је храњиви медијум за културу за изолацију умјерено захтјевних микроорганизама, те је у могућности повећати обогаћивање додатком крви и других додатака прехрани..

То је неселективна подлога за културу, тако да омогућава раст већине Грам позитивних и Грам негативних бактерија, као и неких гљива. Међутим, може постати селективан са додатком антибиотика.

Медијум садржи инфузију телећег мозга и срца, пептидни хидролизат из животињских ткива и казеин панкреасни хидролизат; сва ова једињења делују као извори витамина, амино киселина, азота и угљеника.

Глукоза је угљикохидрат који даје енергију микроорганизмима када га ферментира. Док натријум хлорид и динатријум фосфат одржавају осмотску равнотежу и обезбеђују пХ близу неутралности. Коначно, агар даје чврсту конзистенцију медијуму.

Препаратион

Измерити 52 грама дехидрираног медијума и растворити у једном литру дестиловане воде. Доведите смешу на извор топлоте док не прокуха, често мешајте током процеса растварања.

Можете припремити клинове или плоче БХИ агара без адитива.

Ведгес

За припрему клинова послужите препарат до пуњења пола сваке епрувете, покријте га и стерилизирајте у аутоклаву на 121 ° Ц током 15 минута, када излажете да лежите на бази док се не скрутне. Затим чувајте у фрижидеру до употребе.

Платес

Растворена смеша је аутоклавирана на 121 ° Ц током 15 минута, када је остављена да се охлади на 50 ° Ц и 20 мл медијума је послужено у стерилним Петријевим посудама. Дозвољено им је да се стврдне, преокрену и складиште у фрижидеру док се не употребе. Оставите плоче собној температури прије сијања.

ПХ медијума треба да буде 7,4 ± 0,2.

Неприпремљени медијум је беж и припремљен је свијетло јантар.

Припрема крвног агара

После стерилизације медијума, охлади се на температуру од приближно 45 до 50 ° Ц, у то вријеме додати крв (50 мл), лагано мијешати да се хомогенизира и асептично послужити 20 мл у свакој Петријевој посуди. Ако се на плочи формирају мјехурићи, пламен горионика треба брзо прећи преко мјехурића да би их се уклонило.

Исто тако, специјални медији се могу припремити додавањем одговарајућих адитива када смеша достигне температуру од 45 до 50 ° Ц.

Медиј је трешња црвена.

Усес

Користите без додатака

БХИ агар без адитива је користан као примарна култура и за садњу чистих сојева микроорганизама који су средње или умерено захтевни за каснију идентификацију.

Пошто је светло обојен медиј, идеалан је за посматрање пигмената и зато што не садржи супстанце које ометају, може се користити за извођење биохемијских тестова, као што су оксидаза и каталаза, или за монтажу других биохемијских тестова из колонија које потичу из овог подручја. агар.

Исто тако, БХИ агар клинови су широко кориштени за одржавање сојева за одређено вријеме у лабораторији (бактериотека).

Плоче или клинови засађени на површини са бактеријским сојевима инкубирани су на 37 ° Ц 24 до 48 сати. Док ће у гљивама температура и време инкубације зависити од врсте гљиве која се тражи.

Као базни агар за припрему других медија

Са овом базом могу се припремити обогаћени и селективни медији.

Обогаћена

Његова главна функција је да служи као основа у припреми крвног агара за рутинску употребу у микробиолошким лабораторијама. Посебно, база БХИ је погодна за изолацију сојева Стрептоцоццус сп. Међутим, недостатак му је што није погодан за посматрање узорака хемолизе, јер садржи глукозу.

Такође се користи у припреми зечјег или коњског агара за изолацију Хаемопхилус сп. За боље резултате можете додати додатак за обогаћивање (ИсоВиталеКс).

Ако узорци долазе из респираторног тракта до агара, бацитрацин се може додати да инхибира пратећу флору и повећа вероватноћу опоравка сојева Хаемопхилус сп.

Са друге стране, крвни агар (јагњетина или људски) се може припремити са телистинским цистином да би се изоловао Цоринебацтериум дипхтхериае. Такође, корисно је припремити зечји крвни агар, са додатком цистина и глукозе за изолацију Франциселла туларенсис.

Засејавање плоча крвног агара врши се исцрпљењем и инкубира на 35-37 ° Ц током 24-48 сати у микроаерофилном (5-10% ЦО)₂).

Селективно

Овај медијум са додатком антибиотика може да замени Сабоурауд агар за изолацију гљивица.

Комбинација БХИ агара са хлорамфениколом - гентамицином или пеницилином -, стрептомицином и коњском крвљу идеална је за изолацију Хистопласма цапсулатум.

У зависности од микроорганизма који се изолује, препоручује се инкубација на 35-37 ° Ц или на собној температури у аеробиози. Понекад је инкубација потребна у оба температурна опсега, користећи 2 плоче за то.

Неке гљиве воле Трицхопхитон ментагропхитес треба их инкубирати на собној температури до 7 дана.

Контрола квалитета

Из сваке припремљене шарже препоручује се инкубирати 1 плочу или клин на 37 ° Ц током 24 сата и проверити да нема раста; Посебно је важно када се припрема крвни агар, јер се ради о лако загађеном медију.

С друге стране, квалитет медија може се проценити инокулацијом познатих или сертификованих стандардних сојева и посматрањем њиховог развоја.

У том смислу, за процену БХИ агара без адитива, сојева Есцхерицхиа цоли АТЦЦ 25922, Стапхилоцоццус ауреус АТЦЦ 25923 или Цандида албицанс АТЦЦ 10231. Инкубирају се на 37 ° Ц у аеробиози 24 до 48 сати. У свим случајевима очекује се задовољавајући раст.

За процену плоча крвног агара, сојева  Стрептоцоццус пиогенес АТЦЦ 19615, Стрептоцоццус пнеумониае АТЦЦ 6305 или Трицхопхитон ментагропхитес АТЦЦ 9533.

Бактеријски сојеви су инкубирани на 37 ° Ц у микроаерофилику током 24 сата, док је гљивица инкубирана на собној температури у влажној комори до 7 дана. У свим случајевима очекује се задовољавајући раст.

Референце

1. Лабораториес Британиа. Браин Хеарт инфусион Агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом.
2. БД Лабораториес Агар Браин Хеарт Инфусион (БХИ). 2013. Доступно на: бд.цом.
3. Дифцо Францисцо Сориа Мелгуизо Лабораториес, С.А. Браин Хеарт Инфусион Агар. 2009.
4. Неоген лабораторија. Браин Хеарт Инфусион Агар. Доступно на: фоодсафети.неоген.цом
5. Гил М. Агар: темељ, употреба и припрема. 2018. Доступно на: лифедер.цом.
6. Википедиа цонтрибуторс. Инфузија мозга срца Википедиа, Тхе Фрее Енцицлопедиа. 19. септембар, 2018, 03:58 УТЦ. Доступно на: википедиа.орг. Приступљено 2. марта 2019.
7. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Едиториал Панамерицана С.А. Аргентина.