Типови биохемијских тестова, за шта су важни и за шта су важни



Тхе биохемијски тестови у микробиологији они су скуп хемијских тестова који се изводе на микроорганизмима присутним у узорку како би се идентификовали; Ови микроорганизми су обично бактерије. Постоји велики број биохемијских тестова који су доступни микробиологу.

Међутим, избор ових тестова заснива се на прелиминарним налазима, као што је Грамов узорак боје и карактеристике раста, који омогућавају да бактерије буду додељене одређеној категорији. Биохемијски тестови се углавном заснивају на метаболичким својствима сваке врсте бактерија. 

Нису све бактерије исте особине, па се истражује да ли имају неки одређени ензим додавањем супстрата и чекајући да се реакција догоди. Обично се ово одређивање даје променом боје или пХ у медијуму културе.

Мање од 15 биохемијских тестова је често потребно за поуздану идентификацију бактерије до нивоа врсте. Извођење више биохемијских тестова може повећати повјерење у идентификацију.

Већина ових биохемијских тестова се изводи у серуму или крвној плазми. Међутим, могу се вршити и код других биолошких секрета као што су урин, цереброспинална течност, плеурална течност и столица, између осталих..

Индек

  • 1 Класификација
    • 1.1 Универсал
    • 1.2 Диференцијали
    • 1.3 Специфични
  • 2 Врсте биохемијских тестова
    • 2.1 Тест каталазе
    • 2.2 Тест оксидазе
    • 2.3 Тест сланог манитолног агара (МСА)
    • 2.4 Тест коагулазе
    • 2.5 Тест уреазе
  • 3 За шта су биохемијски тестови??
  • 4 Важност
  • 5 Референце

Класификација

Биохемијски тестови се могу сврстати у 3 групе:

Универсал

Ово су тестови који се могу извести на било ком узорку и који усмеравају микробиолога на следеће биохемијске тестове који се морају обавити да би се добила поуздана идентификација..

Пример

Тест каталазе и оксидазе.

Дифферентиалс

Ово су тестови који се спроводе да би се идентификовали микроорганизми присутни у узорку до нивоа врсте.

Идентификација се врши на основу резултата комбинације тестова, јер појединачни резултати нису довољно информативни да би се направила идентификација.

Пример

ИМВиЦ тестови и тестови коришћења шећера.

Специфични

То су специфични тестови за одређени скуп врста или за подврсту врсте. Ови тестови се обично раде како би се потврдило или идентификовало на нивоу подврста. Појединачни тестови су сами по себи информативни.

Пример

Тест и-Глутамил аминопептидазе.

Врсте биохемијских тестова

Тест каталазе

Тест каталазе је тест којим се доказује присуство ензима каталазе разлагањем водоник пероксида у кисеоник и воду. Мала количина бактерија додаје се капи водоник пероксида (3%) на слајду.

Каталазни тест је једноставан тест који користе микробиолози за идентификацију бактеријских врста и за одређивање способности неких микроба да разграде водиков пероксид продукцијом ензима каталазе..

Ако се посматрају мехурићи кисеоника, то значи да бактерија посједује ензим каталазе, јер катализира разградњу водиковог пероксида у кисик и воду. Тада се каже да је организам позитиван на каталазу (на пример: Стапхилоцоццус ауреус).

Тест оксидазе

Овај тест се користи за идентификацију микроорганизама који садрже ензим цитохром оксидазу (важан у ланцу транспорта електрона). Обично се користи за разликовање породица Ентеробацтериацеае и Псеудомадацеае.

Цитокром оксидаза преноси електроне из ланца за пренос електрона на кисеоник (коначни акцептор електрона) и редукује га у воду. Тестови оксидазе обезбеђују вештачке молекуле донора и акцептора електрона.

Када се донор електрона оксидира дејством цитокром оксидазе, медиј постаје тамно љубичаста и сматра се позитивним резултатом. Тхе мицроорганисм Псеудомонас аеругиноса је пример бактерије позитивне оксидазе.

Тест сланог манитолног агара (МСА)

Ова врста теста је и селективна и диференцијална. МСП ће одабрати организме способне за живот у срединама са високим концентрацијама соли, као што су врсте Стапхилоцоццус за разлику од врсте Стрептоцоццус, чији је раст инхибиран под овим условима.

Диференцијална компонента у овом тесту је шећерни манитол. Организми способни да користе манитол као извор хране ће произвести нуспроизводе ферментације, који су кисели и стога ће снизити пХ медијума.

Киселост медијума узрокује да индикатор пХ, фенол црвени, постане жут. Примери врста бактерија које се могу разликовати овом методом су: Стапхилоцоццус ауреус (позитивно зато што ферментира манитол) и Стапхилоцоццус епидермидис (негативно јер манитол не ферментира).

Цоагуласе тест

Коагулаза је ензим који помаже коагулацију крвне плазме. Овај тест се спроводи на позитивним грам-позитивним бактеријама које су позитивне на каталазу и идентификују их Стапхилоцоццус ауреус (позитивна коагулаза) У ствари, коагулаза је фактор вируленције ове врсте бактерија.

Формирање угрушака око инфекције изазване овом бактеријом вероватно га штити од фагоцитозе. Овај тест је веома користан када желите да направите разлику између Стапхилоцоццус ауреус других врста Стапхилоцоццус који су негативна коагулаза.

Тест уреазе

Овај тест се користи за идентификацију бактерија које могу хидролизовати уреу, користећи ензим уреазу. Обично се користи за разликовање спола Протеус других цријевних бактерија.

Хидролиза уреје производи амонијак као један од његових производа. Ова слаба база повећава пХ медијума изнад 8,4 и пХ индикатор (фенол црвени) се мења од жуте до ружичасте. Пример позитивне бактерије уреазе је Протеус мирабилис.

За шта су биохемијски тестови??

Биохемијски тестови у микробиологији се користе за дијагностицирање болести узрокованих микроорганизмима и за праћење лијечења које се проводе у борби против њих. Осим тога, користе се за скрининг инфективних болести и њихову прогнозу..

Биохемијска идентификација микроорганизама даје идеју о томе шта ови микроорганизми могу да ураде, будући да постоји могућност дискриминације различитих сојева исте врсте специфичним биохемијским профилима..

Разлике у специфичним ензимским активностима информишу о екологији, физиологији или природном станишту микроорганизма, што се у неким случајевима може сматрати важним информацијама.

Значај

Структурне разлике у погледу облика, величине и распореда бактерија помажу врло мало у процесу идентификације, јер постоје многе врсте бактерија које имају сличан облик, величину и распоред..

Из тог разлога, идентификација бактерија се заснива првенствено на разликама у њиховим биохемијским активностима.

Свака врста бактерија има добро дефинисан скуп метаболичких активности које се разликују од свих других врста. Ови биохемијски "отисци прстију" су својства контролисана бактеријским ензимима.

Дакле, биохемијски тестови су важни јер помажу истраживачу да правилно идентификује патогене присутне у узорку и на тај начин да препоручи одговарајући третман пацијенту..

Референце

  1. Бецкетт, Г., Валкер, С. и Рае, П. (2010). Цлиницал Биоцхемистри (8. изд.). Вилеи-Блацквелл.
  2. Цларке, П.Х., & Цован, С.Т. (1952). Биохемијске методе за бактериологију. Јоурнал оф Генерал Мицробиологи, 6(1952), 187-197.
  3. Гав, А., Мурпхи, М., Сривастава, Р., Цован, Р., Ст, Д. & О'Реилли, Ј. (2013). Цлиницал Биоцхемистри (5. изд.). Елсевиер Хеалтх Сциенцес.
  4. Голдман, Е. и Греен, Л. (2008). Практични приручник микробиологије (2. изд.). ЦРЦ Пресс.
  5. Харриган, В. (1998). Лабораторијске методе у микробиологији хране (3. изд.). Ацадемиц Пресс.
  6. Васантхакумари, Р. (2009). Працтицал Мицробиологи. БИ Публицатионс Пвт Лтд.