Основа, припрема и употреба соли агара и манитола

Тхе агар соли и манитол или слан манитол је чврсти, селективни и диференцијални медијум културе. Креирао га је Цхапман за изолацију патогених Грам позитивних кока, посебно Стапхилоцоццус ауреус.

Међутим, такође је корисно изоловати Стапхилоцоццус епидермидис, који понекад могу бити присутни као опортунистички патогени, и Стапхилоцоццус сапропхитицус, препознатљив уринарни патоген, међу осталим врстама.

Неки Ентероцоццус могу расти у овом медију, као и одређени грам-позитивни бацили који стварају споре.

Овај медијум је веома користан у анализи клиничких узорака, али се такође користи у микробиолошком испитивању хране и контроли квалитета индустријских производа, као што су козметика, лекови, између осталог..

Солани манитол агар се састоји од екстракта и пептона говедине, триптина, манитола, натријум хлорида, фенол црвеног и агара..

Индек

• 1 Фоундатион
• 2 Припрема
• 3 Усес
• 4 Контрола квалитета
• 5 Завршна разматрања
• 6 Референце

Фоундатион

Манитол агар је селективан захваљујући високој концентрацији соли. Салинитет делује као инхибиторна супстанца и спречава раст Грам-негативних бактерија.

Такође је различит због присуства угљених хидрата манитола и фенолног црвеног пХ индикатора. Од тога, бактерије способне за ферментацију манитола производе киселине, закисељују медијум, претварајући колоније и средње жуте боје.

С друге стране, колоније које не ферментирају манитол расту у медију узимајући хранљиве материје које су добијене из екстракта и пептонас меса и триптеина. Одатле бактерије извлаче угљеник, азот, витамине и минерале неопходне за њихов раст.

Колоније у овом случају могу бити слабе или јаке ружичасте, а медијум остаје исте боје или се мијења у фуксији.

Агар је супстанца која обезбеђује конзистентност медија.

Препаратион

Да би се припремио један литар сланог манитол агара, изваже се 111 г дехидрираног медија комерцијалне претежне куће и раствори у 1000 мл дестиловане воде, користећи фиолу.

Топлота се наноси тако што се често уклања медиј за побољшање процеса растварања. Пусти да прокува минут.

Ставите фиолу у аутоклав на 121 ° Ц током 15 минута.

На крају времена, фиола се извади из аутоклава, остави да стоји и служи између 15 и 20 мл на стерилним Петријевим посудама када је температура приближно 50 до 55 ° Ц..

Дозвољено је да се стврдне, наручује у обрнутом облику у плакету и чува у фрижидеру до његове употребе. Пре постављања узорка, морате сачекати да плоча узме температуру околине.

Плоче се сијају стриацијом или сеје на површину дригалском шпатулом. Крајњи пХ припремљеног медија треба да буде 7,4 ± 0,2

Боја дехидрираног медија је светло беж, а боја припремљеног медија је наранџасто црвена.

Усес

Због своје високе селективности, овај медиј је идеалан за садњу узорака са мешовитом флором у којој се жели тражити присуство Стапхилоцоццус ауреус, као главни патоген овог рода.

У том смислу, једна од њених најчешћих примена је у микробиолошкој анализи узорака фарингеалних ексудата и назалног исцједка, посебно за откривање асимптоматских носилаца С. ауреус.

Неке земље су спровеле ову анализу као обавезан захтев за људе који желе да раде као продавци хране.

Ова контрола спречава запошљавање људи који су носиоци С. ауреус, избегавајући масовно тровање храном, због конзумирања хране контаминиране стафилококним ентеротоксином.

Такође се може укључити у засађивање инфекција рана, култура крви, ЦСФ, бронхоалвеоларни лаваж, између осталих..

Солани манитол агар је користан за поновно изоловање колонија уринских култура из ЦЛЕД агара или крвног агара чија је грам открила Грам-позитивне коке у кластерима..

Такође важи и за микробиолошку анализу хране, воде за пиће, земљишта, између осталих примена.

Контрола квалитета

Када се припреми шаржа плоча са сланим манитол агар, препоручљиво је извршити контролу квалитета. Контролни сојеви су посијани да би се показало да ли постоји раст или не.

Као позитивна контрола, познати сојеви Стапхилоцоццус ауреус. Она мора задовољавајуће расти развојем жутих колонија, а медијум постаје исте боје.

Исто тако, погодно је укључити познати сој Стапхилоцоццус епидермидис. Мора расти задовољавајуће развијајући ружичасте колоније, а средина остаје исте боје или тамније у јачој ружичастој боји.

Као негативна контрола користе се сојеви који не би требали расти у овом медију. На пример, можете засадити познати сој Есцхерицхиа цоли или Клебсиелла пнеумониае. Очекивани резултат је потпуна инхибиција, тј. Никакав раст.

Додатно, плочу без инокулације треба инкубирати. У њему не би требало да буде раста, нема промене боје.

Важно је да се плоча не користи ако постоје индикације погоршања, као што је контаминација, дехидрација, обезбојење, између осталих..

Завршна разматрања

Када се користи засићени медијум манитолног агара, морају се узети у обзир неки важни аспекти:

-Добијање раста жутих колонија не указује на то да јесте Стапхилоцоццус ауреус. Мора се запамтити да су неки сојеви Ентероцоццус-а способни да расту у овом медију и ферментирају манитол, као и одређене Грам-позитивне споре-формирајуће бациле..

Према томе, важно је извршити Грам у колонији и тест каталазе.

-С друге стране, мора се сматрати да се друге врсте стафилокока разликују од других врста ауреус Такође су способни за ферментацију манитола. Због тога је важно подгајати колонију храњивим бујоном који треба узети од њега и обавити тест коагулазе.

Међу Стапхилоцоццус врстама које су клинички значајне за мушкарце ферментацију манитола су: С. ауреус, С. симуланс, С. цапитис ссп цапитис, С. цапитис ссп уреалитицус, С. килосус, С. цохнии ссп уреалитицум, између осталог.

Други могу дати варијабилну реакцију, то јест, понекад позитивну, а понекад и негативну. Неки су С. сапропхитицус, С. хаемолитицус, С. варнери, С. интермедиус, између осталог.

-Не препоручује се узимање колонија директно из манитол агара да би се обавио коагулазни тест, пошто висока концентрација соли у медију може да утиче на резултат.

-Коначно, препоручује се инкубирање плоча засађених сланим манитолом до 48 сати, због чињенице да неки сојеви С. ауреус Могу полако ферментирати манитол, иако то није често.

Референце

1. Лабораториес Британиа. Манитол слан агар. 2015. Доступно на: британиалаб.цом
2. "Слан Манитол Агар". Википедиа, Тхе фрее енцицлопедиа. Окт 31, 2018, 19:08 УТЦ. 17.01.1999, 20:55, доступно на: ен.википедиа.орг.
3. Конеман Е, Аллен С, Јанда В, Сцхрецкенбергер П, Винн В. (2004). Микробиолошка дијагноза. (5. изд.). Аргентина, Уводник Панамерицана С.А..
4. Форбес Б, Сахм Д, Веиссфелд А. (2009). Микробиолошка дијагностика Баилеи & Сцотт. 12 ед. Аргентина Панамерицана С.А Уводник
5. БД Лабораториес БД Маннитол Салт Агар. 2013. Доступно на: бд.цом.