Нефелометрија у чему се састоји и примена
Тхе непхелометри састоји се у мерењу зрачења узрокованог честицама (у раствору или у суспензији), на тај начин мерењем снаге распршеног зрачења под углом који није правац упадног зрачења.
Када се честица у суспензији достигне помоћу снопа светлости, постоји део рефлектованог светла, други део се апсорбује, други део се преусмерава и остатак се преноси. Зато, када светлост удари у прозирни медијум у коме се налази суспензија чврстих честица, суспензија се примети замућена.
Индек
- 1 Шта је непхелометрија??
- 1.1 Дисперзија зрачења честица у раствору
- 1.2 Непхелометер
- 1.3 Одступања
- 1.4 Метролошке карактеристике
- 2 Апплицатионс
- 2.1 Детекција имуних комплекса
- 2.2 Остале апликације
- 3 Референце
Шта је непхелометрија??
Дисперзија зрачења честица у раствору
У тренутку када сноп светлости удари у честице супстанце у суспензији, смер ширења снопа мења свој правац. Овај ефекат зависи од следећих аспеката:
1.Димензије честица (величина и облик).
2. Карактеристике суспензије (концентрације).
3. Таласна дужина и интензитет светлости.
4. Раздаљина упадне светлости.
5. Угао детекције.
6. Индекс рефракције медијума.
Непхелометер
Нефелометар је инструмент који се користи за мерење честица суспендованих у течном узорку или у гасу. Дакле, фотоћелија постављена под углом од 90 ° у односу на извор светлости детектује зрачење честица присутних у суспензији.
Такође, светлост која се рефлектује од честица према фотоћелији зависи од густине честица. Дијаграм 1 представља основне компоненте које чине нефелометар:
А. Извор зрачења
У нефелометрији је од виталног значаја имати извор зрачења са високим излазом светлости. Постоје различите врсте, од ксенонских лампи и жаруља са живином паром, волфрамових халогених сијалица, ласерског зрачења, између осталих.
Б. Моноцхроматор систем
Овај систем се налази између извора зрачења и кивете, тако да се на тај начин избегава упад на кивету зрачења са различитим таласним дужинама у односу на жељено зрачење..
У супротном, реакције флуоресценције или ефекти загревања у раствору би изазвали одступања од мерења.
Ц. Читање кивете
То је углавном призматичан или цилиндрични контејнер, и може имати различите величине. У овом је решење у студији.
Д. Детектор
Детектор се налази на одређеној удаљености (обично врло близу резервоара) и одговоран је за детекцију зрачења распршеног честицама суспензије.
Е. Систем читања
Уопштено, ради се о електронској машини која прима, конвертује и обрађује податке, што је у овом случају мерење добијено из изведене студије.
Девиатионс
Свако мерење зависи од процента грешке, који се углавном даје:
Контаминиране канте: ин кивете било спољним раствору који се проучава, који је унутар или изван базена, агенс смањује светлосни пут зрачења до детектора (дефектне кивета, придржавајући прах у зидовима кивету).
Интерференцес: присуство неке микробиолошке контаминације или замућености распршује енергију зрачења, повећавајући интензитет дисперзије.
Флуоресцентна једињењаОво су једињења која, када су побуђена инцидентним зрачењем, проузрокују погрешна и висока очитавања густине дисперзије.
Конзервација реагенса: неадекватна температура система може проузроковати неповољне услове испитивања и подстаћи присуство мутних реагенса или талога.
Флуктуације електричне енергије: да би се избегло да инцидентно зрачење буде извор грешке, препоручују се стабилизатори напона за равномерно зрачење.
Метролошке карактеристике
Пошто је блистава моћ детектованог зрачења директно пропорционална масене концентрације честица, нефелометријских студије имају у теорији метролошка већом осетљивошћу него друге сличне методе (као што турбидиметријском).
Поред тога, ова техника захтева разблажене растворе. Ово омогућава да се и појаве апсорпције и рефлексије сведу на минимум.
Апплицатионс
Нефелометријске студије заузимају веома важно место у клиничким лабораторијама. Апликације се крећу од одређивања имуноглобулина и протеина акутне фазе, комплемента и коагулације.
Детекција имуних комплекса
Када биолошки узорак садржи антиген од интереса, он се меша (у пуферском раствору) са антителом да би се формирао имуни комплекс.
Нефелометрија мери количину светлости која се распршује реакцијом антиген-антитело (Аг-Ац), и на тај начин откривају имунолошки комплекси..
Ова студија се може извести на два начина:
Непелометрија завршне тачке:
Ова техника се може користити за анализу крајње тачке, у којој је антитело из испитиваног биолошког узорка инкубирано 24 сата..
Аг-Ац комплекс се мери непхелометром, а количина распршене светлости се упоређује са истим мерењем извршеним пре формирања комплекса.
Кинетичка непхелометрија
У овој методи се континуирано прати стопа формирања комплекса. Брзина реакције зависи од концентрације антигена у узорку. Овде се мерења узимају као функција времена, тако да се прво мерење узима у време "нула" (т = 0).
Кинетичка непхелометрија је најчешће коришћена техника, будући да се истраживање може обавити за 1 сат, у поређењу са дугим временским периодом методе крајње тачке. Однос дисперзије се мери одмах након додавања реагенса.
Према томе, све док је реагенс константан, количина присутног антигена се сматра директно пропорционалном брзини промене.
Остале апликације
Нефелометрија се обично користи у анализи хемијског квалитета воде, за одређивање јасноће и за контролу процеса њеног третмана.
Користи се и за мерење загађења ваздуха, при чему се концентрација честица одређује из дисперзије коју производе у инцидентној светлости..
Референце
- Британница, Е. (с.ф.). Нефелометрија и турбидиметрија. Рецоверед фром британница.цом
- Ал-Салех, М. (с.ф.). Турбидиметрија и нефелометрија. Ретриевед фром пдфс.семантицсцхолар.орг
- Бангс Лабораториес, Инц. (с.ф.). Рецоверед фром тецхноцхемицал.цом
- Мораис, И. В. (2006). Турбидиметријска и нефелометријска анализа протока. Преузето са репоситорио.уцп.п
- Сассон, С. (2014). Принципи нефелометрије и турбидиметрије. Добављено из нотесониммунологи.филес.вордпресс.цом
- Станлеи, Ј. (2002). Ессентиалс оф Иммунологи & Серологи. Албани, НИ: Тхомпсон Леарнинг. Преузето са боокс.гоогле.цо.ве
- Википедиа. (с.ф.). Нефелометрија (медицина). Преузето са ен.википедиа.орг